液相色譜儀儀器操作與維護

1. 儀器設備

儀器設備：GX液相色譜儀，配備二極管陣列（PDA）、熒光檢測器，島津LC-20AT。

2. 適用范圍

適用于有紫外或熒光吸收的有機化合物的分離與定量分析。主要用于水、空氣和廢氣、土壤、固體廢物、生物體等樣品中多環(huán)芳烴類(lèi)化合物的測定。

3. 操作步驟

3.1 檢查：開(kāi)機前檢查流動(dòng)相種類(lèi)、液位是否滿(mǎn)足要求，色譜柱是否匹配，系統管路連接是否到位。流動(dòng)相在使用之前一定要經(jīng)過(guò)0.45μm的膜過(guò)濾，并且作超聲脫氣處理。注意洗針溶劑是否足夠，并檢查廢液瓶液位。

3.2 開(kāi)機：依次打開(kāi)泵A、泵B、主機、柱溫箱、檢測器的電源。將泵A與泵B的排液閥逆時(shí)針旋轉180°松開(kāi)，分別按下面板上的pump按鈕，數秒鐘后兩泵各自啟動(dòng)開(kāi)始排氣泡，此過(guò)程需要數分鐘時(shí)間。結束后兩泵自行停止。然后順時(shí)針旋轉180°將排液閥擰緊。待主機自檢結束后，點(diǎn)擊電腦桌面上的Lcsolution快捷方式，選擇合適的聯(lián)機配置進(jìn)入工作站。從File→Open Method File→選擇合適的方法→Open，然后在儀器參數界面點(diǎn)擊Download。若此時(shí)泵沒(méi)有反應，點(diǎn)擊工具欄中System On/Off按鈕即可。

3.3 平衡色譜柱：用方法給定的初始流動(dòng)相平衡色譜柱，平衡時(shí)間至少為流過(guò)10倍柱體積所需的時(shí)間，待基線(xiàn)平穩后才可進(jìn)樣。

3.4 編輯序列：從主界面左側工具欄中點(diǎn)擊Batch Processing→Batch Wizard進(jìn)入序列編輯向導，按步驟編輯合適的樣品類(lèi)型、樣品數、樣品名、文件名，點(diǎn)擊完成，結束序列編輯。

3.5 樣品分析：將經(jīng)過(guò)預處理的樣品經(jīng)0.45μm的膜過(guò)濾后裝入進(jìn)樣小瓶中，置于樣品盤(pán)上與序列相對應的位置。

3.6關(guān)機：樣品分析結束后，用純有機溶劑沖洗色譜柱，沖洗時(shí)間至少為流過(guò)10倍柱體積所需的時(shí)間。實(shí)際所需時(shí)間可能更長(cháng)，待基線(xiàn)平穩即可。在儀器狀態(tài)欄將流量逐漸調小至0，退出工作站，依次關(guān)閉檢測器、柱溫箱、泵和主機的電源。

3.7 記錄。

4. 日常維護

保持儀器安裝房間環(huán)境整潔、通風(fēng)良好，環(huán)境條件適宜，檢查儀器接地良好。經(jīng)常清理儀器內外灰塵，若長(cháng)時(shí)間不用，建議每月至少用甲醇或乙腈等溶劑徹底清洗系統流路一次，并且檢查系統的完好情況。

5. 運行檢查

檢查樣品溶液中待測組分的分離和響應是否正常，基線(xiàn)和噪聲的變化是否在合理的范圍內，及時(shí)關(guān)注柱前壓的變化情況。

6. 計量檢定

每年進(jìn)行一次計量檢定，檢定合格后應及時(shí)更新檢定標識，填寫(xiě)記錄。

7. 期間核查

7.1 核查頻次：在兩次檢定之間，每半年進(jìn)行一次儀器期間核查。如果儀器在使用中出現異?；蛟诰S修后，增加期間核查的頻次。

7.2 核查內容：精密度核查，使用苯并[a]芘標準溶液重復6次分析，響應值RSD≤5%為合格。

8. 注意事項

8.1 流動(dòng)相、待測樣品等所有進(jìn)入分析系統的液體必須經(jīng)過(guò)0.45μm的濾膜過(guò)濾，去除顆粒物，防止堵塞色譜分離柱，致使柱前壓力增高，損壞高壓泵。

8.2 待測樣品溶液應該在前處理的過(guò)程中盡量去除干擾物質(zhì)，進(jìn)樣前應轉換成流動(dòng)相溶劑體系或用流動(dòng)相定容，再經(jīng)0.45μm的濾膜過(guò)濾后方可進(jìn)樣。

8.3 流動(dòng)相的pH值一般情況下不能高于9或小于2，否則易損壞色譜柱。

8.4 若使用鹽度較高的緩沖溶液體系為流動(dòng)相，樣品分析結束后應換成低有機相比例的流動(dòng)相，如含5%甲醇或乙腈的水相流動(dòng)相反復沖洗系統，防止在進(jìn)樣閥、柱塞桿、色譜柱等處有鹽析出，對系統造成損壞。ZUI后逐漸過(guò)渡到純有機相流動(dòng)相沖洗系統，以保護色譜柱。

8.5 如柱壓升高明顯、或在色譜柱平衡足夠長(cháng)的時(shí)間后仍發(fā)現組分的保留時(shí)間有嚴重漂移，首先考慮可能是預柱受到了沾污，可將預柱反接，用甲醇或乙腈沖洗；若沖洗后還是不能解決問(wèn)題，建議更換預柱。

8.6 如8.5無(wú)法解決問(wèn)題，需檢查色譜柱，拆開(kāi)柱頭部分，檢查柱頭填料是否塌陷、是否變色、篩板是否堵塞，輕輕刮除1-2mm填料，超聲清洗篩板，再緊壓補上同類(lèi)填料，壓緊篩板擰緊柱頭，接回色譜系統，用甲醇或乙腈流動(dòng)相沖洗，如仍無(wú)法改善建議更換色譜柱。

8.7流動(dòng)相應經(jīng)負壓抽濾或超聲去除氣泡，使用較長(cháng)時(shí)間應經(jīng)常觀(guān)察流動(dòng)相液位，防止氣泡進(jìn)入系統。

8.8分析過(guò)高濃度樣品后應注意后續樣品濃度值的可信度，必要時(shí)增加平行樣或空白樣測定，防止系統殘留帶來(lái)準確度干擾；每次分析完樣品后必須做空白樣，用流動(dòng)相清洗管路和色譜柱30min后再關(guān)機。