當前位置:首頁(yè)  >  新聞動(dòng)態(tài)  >  行業(yè)標準  >  紫外分光光度計使用的難點(diǎn)解析

紫外分光光度計使用的難點(diǎn)解析

發(fā)布時(shí)間: 2024-01-17      點(diǎn)擊次數: 662

637937547556817653655.jpg

準確測定有機化合物的分子結構,對從分子水平去認識物質(zhì)世界,推動(dòng)近代有機化學(xué)的發(fā)展是十分重要的。采用現代儀器分析方法,可以快速、準確地測定有機化合物的分子結構。在有機化學(xué)中應用最廣泛的測定分子結構的方法是四大光譜法:紫外光譜、紅外光譜、核磁共振和質(zhì)譜。紫外和可見(jiàn)光譜(ultraviolet and visible spectrum)簡(jiǎn)寫(xiě)為UV。

紫外光譜的發(fā)展史:1852年,比爾(Beer)參考了布給爾(Bouguer)1729年和朗伯(Lambert)在1760年所發(fā)表的文章,提出了分光光度的基本定律,即液層厚度相等時(shí),顏色的強度與呈色溶液的濃度成比例,從而奠定了分光光度法的理論基礎,這就是著(zhù)名的朗伯比爾定律。1854年,杜包斯克(Duboscq)和奈斯勒(Nessler)等人將此理論應用于定量分析化學(xué)領(lǐng)域,并且設計了第一臺比色計。到1918年,美國國家標準局制成了第一臺紫外可見(jiàn)分光光度計。此后,紫外可見(jiàn)分光光度計經(jīng)不斷改進(jìn),又出現自動(dòng)記錄、自動(dòng)打印、數字顯示、微機控制等各種類(lèi)型的儀器,使光度法的靈敏度和準確度也不斷 提高,其應用范圍也不斷擴大。紫外可見(jiàn)分光光度法從問(wèn)世以來(lái),在應用方面有了很大的發(fā)展,尤其是在相關(guān)學(xué)科發(fā)展的基礎上,促使分光光度計儀器的不斷創(chuàng )新,功能更加齊全,使得光度法的應用更拓寬了范圍。

紫外分光光度計工作原理:1、物質(zhì)的吸收光譜本質(zhì)上就是物質(zhì)中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長(cháng)的光能量,相應地發(fā)生了分子振動(dòng)能級躍遷和電子能級躍遷的結果。由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結構,其吸收光能量的情況也就不會(huì )相同。因此,每種物質(zhì)就有其特有的、固定的吸收光譜曲線(xiàn),可根據吸收光譜上的某些特征波長(cháng)處的吸光度的高低判別或測定該物質(zhì)的含量,這就是分光光度定性和定量分析的基礎。

2、又因為許多物質(zhì)在紫外-可見(jiàn)光區有特征吸收峰,所以可用紫外分光光度法對這些物質(zhì)分別進(jìn)行測定(定量分析和定性分析)。紫外分光光度法使用基于朗伯-比耳定律。

3、朗伯-比耳定律(Lambert-Beer)是光吸收的基本定律,俗稱(chēng)光吸收定律,是分光光度法定量分析的依據和基礎。當入射光波長(cháng)一定時(shí),溶液的吸光度A是吸光物質(zhì)的濃度C及吸收介質(zhì)厚度l(吸收光程)的函數。

4、首先確定實(shí)驗條件,并在此條件下測得標準物質(zhì)的吸收峰以及其對應波長(cháng)值(同時(shí)可獲得該物質(zhì)的最大吸收波長(cháng));再在選定的波長(cháng)范圍內(或最大波長(cháng)值處),分別以(不同濃度)標準溶液的吸光度和溶液濃度為橫、縱坐標繪出化合物溶液的標準曲線(xiàn)得到其所對應的數學(xué)方程;接著(zhù)在相同實(shí)驗條件下配制待測溶液,測得待測溶液的吸光度,最后用已獲得的標準曲線(xiàn)方程求出待測溶液中所需測定的化合物的含量。

5、具有芳香環(huán)或共軛雙鍵結構的有機化合物,根據在特定吸收波長(cháng)處所測得的吸收度,可用于藥品的鑒別、純度檢查及含量測定。

紫外分光光度計難點(diǎn)——校正方法:紫外分光光度計的校正方法:分光光度法的最重要的一個(gè)物理化學(xué)量是吸光度。為了獲得準確的研究結果,準確測得樣品溶液的吸光度是非常重要的。一般,分析結果的不可靠性與偶然誤差和系統誤差有關(guān)。偶然誤差影響測量的精密度,可通過(guò)足夠數量測量的統計處理來(lái)減少;系統誤差影響測量結果的準確度,可在大體相同實(shí)驗條件下,用比較一種物質(zhì)的準確測量結果,使系統誤差統一起來(lái)。而分光光度計的系統誤差(波長(cháng)校正、分光光度計的慢散光、放大器的線(xiàn)性響應、暗電流和比色皿的光程)和操作誤差(溫度改變、儀器讀數、操作者的改變、使用物質(zhì)的純度、稱(chēng)量和濃度、pH)對測量吸光度的影響是可以檢查和校正的。關(guān)于操作誤差,多數情況下,通過(guò)嚴格按操作程序測量、儀器調零、準確稱(chēng)量等來(lái)控制或減少這種誤差的產(chǎn)生。關(guān)于儀器的系統誤差,可通過(guò)對分光光度計的定期校正來(lái)克服,若所需準確度很高的測量,則必須天天校正。

紫外分光光度計難點(diǎn)——讀數不穩定:1、先不放比色皿,看儀器是否漂移。如果不漂移,說(shuō)明儀器正常。

2、放入空白溶液比色皿調零,讀數漂移到一定數值后,取出比色皿看一下,內壁是否有極細小的氣泡。

一般紫外光度計讀數不穩定的根本原因應該有兩類(lèi):一類(lèi)是能量降低,信噪比下降,這個(gè)可能性比較大;另一類(lèi)是信號接收和處理故障。

1、能量降低

(1) 比色皿

如果是在400nm以下波長(cháng)測量,需使用石英比色皿,假如使用普通玻璃比色皿會(huì )吸收大部分的紫外能量。還有比色皿一般有光面和毛面之分,毛面是手捏的,光面是對正光路的。

(2)樣品架:

檢查樣品架是否在正確的槽位上,光是否全部照在比色皿上。方法是把波長(cháng)設定到550nm左右,這時(shí)是比較明亮的黃綠色光,在樣品室內用個(gè)小紙片擋下就能看到光斑。這個(gè)方法也能檢測可見(jiàn)區的光源是否正常,濾光盤(pán)及波長(cháng)驅動(dòng)是否正常。

(3)空白樣品

樣品室不放任何東西對空氣調零,看是否穩定。如果穩定的話(huà),應該是空白樣品本身吸光度太高了。方法是先對空氣調零,然后把空白樣品放入光路中看讀數。如果讀數很大,例如接近3A,則不可用。

(4)光源

先確認分析波長(cháng)值,一般紫外可見(jiàn)有2個(gè)光源,紫外區用氘燈,可見(jiàn)區用鎢燈,切換點(diǎn)一般在340nm-400nm。鎢燈光較為明亮刺眼,氘燈光偏青紫色。如果儀器后面有透光窗口可以直接看,如果沒(méi)有的話(huà),需要打開(kāi)外殼,打開(kāi)燈室罩。光源都是用壽命的,能量變弱或干脆不亮了,要換燈。也有比較小的可能是光源供電電路故障,例如電源老化后可能導致無(wú)法正常點(diǎn)亮氘燈。

(5)光路

看光路是否偏了,可以把波長(cháng)設定到550nm左右,觀(guān)察樣品室內有無(wú)黃綠色光線(xiàn),光斑能否正確照在接收器窗口上。確認燈室內光源光斑是否正確照在單色器入狹縫上,確認光路中有無(wú)雜物擋住。確認單色器內反射鏡、透鏡、光柵、濾光片等是否發(fā)霉或積滿(mǎn)灰塵,這個(gè)需要廠(chǎng)家才能處理。

(6)驅動(dòng)電路故障

例如濾光盤(pán)驅動(dòng)異常,導致濾光片用錯或者干脆光路被遮擋。一般廠(chǎng)家或專(zhuān)業(yè)人員處理。

2、信號接收和處理故障

接收器(例如光電池或者光電倍增管)、放大電路、AD轉換電路等都有可能。這類(lèi)問(wèn)題一般由廠(chǎng)家或專(zhuān)業(yè)人員處理。



關(guān)


電話(huà):TEL

0538-6636150

郵箱:EMAIL

shouchuanghb@126.com

地址:ADDRESS

山東省泰安市泰山區溫泉路54號

版權所有 ? 2022 泰安首創(chuàng )環(huán)保設備有限公司 Al Rights Reseved    備案號:魯ICP備17010793號-1
技術(shù)支持:環(huán)保在線(xiàn)    管理登陸    sitemap.xml

av导航大全精品|JAPANESE国产中文在线观看|亚洲第一区在线|久久99亚洲精品|狠狠狼鲁亚洲综合网